要想獲得的孢子質量高，應選擇最適當的溫度區間，微生物在一個較寬的溫度范圍內生長。培養溫度的提高，促進菌體代謝活動加快，培養時間縮短，但是菌體進行糖代謝和氮代謝的各種酶類，對溫度的敏感性不同。溫度對微生物的影響，不僅表現對菌體表面的作用，而且因熱平衡的關系，熱傳遞至菌體內，對茵體內部所有結構物質都有作用。因此，培養溫度不同，菌種生理狀態也不同，如果不是在最適溫度培養孢子，生產能力下降。溫度和微生物生長關系，一方面在最適溫度范圍內，生長速度隨溫度增高而增加。另一方面不同生長階段微生物對溫度反映不同。但不管微生物處于何種生長階段，如果培養的溫度超過其最高溫度，則都要死亡。任何微生物生長都需要最適的生長溫度，在此溫度范圍內微生物生長繁殖最快。如果所培養微生物能承受稍高一些溫度進行生長和繁殖，這對生產有很大好處，即可減少污染雜菌機會和夏季培養所需降溫輔助設備，因此對培養高溫菌種有一定生產意義。由生物體生命活動可看作是相互連續進行的酶反應，任何化學反應都和溫度相關，通常在生物學范圍內每升高10℃，生長速度加快一倍，因此溫度直接影響酶反應，因而影響生物體生命活動，對于微生物來說，溫度直接影響其生長和合成酶。如果培養溫度低于其最低生長溫度，則生長要受到抑制。為使種子罐培養溫度控制在規定范圍內，生產上常在種子罐設備上裝有熱交換設備。制備斜面孢子培養基濕度對孢子數量、質量和形成速度有較大影響。空氣中相對濕度高時，培養基內水分蒸發少；反之亦然。在北方氣候干燥地區孢子斜面長得快，在含有少量水分的試管斜面培養基下部孢子長得較好，而斜面上部由于水分蒸發呈干癟狀，孢子稀少。在氣溫高、濕度大的地區，斜面孢子長得慢，是因為試管下部冷凝水多而不利于孢子的形成。相對濕度在40%-45%時孢子數量最多。本文參考《發酵工程原理與技術》一書。